什么是CRISPR/Cas9?
CRISPR/Cas9是精确修改基因序列以及控制和检测基因表达的有力工具。 “CRISPR”是指簇状有规律间隔的短回文重复。
CRISPR平台技术利用一个由蛋白质Cas9组成的分子复合物，加上一个或多个引导RNA，可以定向到所需的DNA序列。
CRISPR是如何被使用的？
CRISPR分子复合物在活细胞中的任何所需位置与基因组结合。
通过这种方法，研究人员将CRISPR作为一个 “分子文字处理器 “来专门改变目标位点的DNA序列（DNA删除、插入或替换），改变目标位点的调控，或用标记物标记位点。
基因编辑
- 通过NHEJ进行双链断裂修复，即基因被Cas9切断，然后通过容易出错的非同源末端连接进行修复
- 碱基编辑，在这种情况下，催化受损的Cas9与核碱基脱氨酶融合，可以将一个碱基转化为另一个碱基，而不切断DNA
- 通过HDR进行双链断裂修复，即基因被Cas9切割，然后在有修复模板DNA的情况下通过同源定向修复进行精确修复
- Prime editing，即催化受损的Cas9与反转录酶相融合，使用扩展的引导RNA作为修复模板进行精确的基因修饰
基因调节
- 激活 (CRISPRa) 催化不活跃的Cas9与转录激活结构域融合在一起，向上调节基因表达
- 基因抑制 (CRISPRi) 催化不活跃的Cas9与转录抑制结构域相融合，可下调基因表达
基因标签
- 诊断和成像：催化不活跃的Cas9与flourophore融合，可识别目标序列的存在和位置
菌种创建
- 可以创建新的菌种，用于研究、食品、纺织品和制造